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共聚焦顯微利用點掃描和針孔光闌，有效抑制離焦光干擾，從而獲得高對比度的光學切片圖像，并支持三維重構。這種成像方式常用于厚組織切片和三維細胞結構的成像，是研究組織空間關系和細胞群體分布的重要工具。

由于其依賴逐點掃描，信號采集速度有限，同時在深層成像時光損耗明顯。因此對相機的主要需求是高靈敏度和低讀出噪聲，以在弱信號條件下保持成像質量；同時需要高速讀出以提升掃描效率，以及具備較寬的動態范圍，以便在同一張圖像中同時分辨淺層與深層信號。