24/09/26熒光偶極子的取向分布和擺動(dòng)角度對(duì)細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和狀態(tài)具有重要影響，但由于寬場(chǎng)顯微鏡的光學(xué)切片能力差，偏振調(diào)制信號(hào)容易受到相鄰熒光團(tuán)的干擾。
本文提出了一種利用偏振結(jié)構(gòu)照明實(shí)現(xiàn)光學(xué)切片的偏振調(diào)制成像方法，并結(jié)合雙色比率成像測(cè)量極性脂質(zhì)。結(jié)果顯示，該方法顯著提升了偶極子取向和擺動(dòng)測(cè)量的精度。與傳統(tǒng)的共聚焦偏振成像相比，這種方法的成像速度提高了一個(gè)數(shù)量級(jí)，能夠捕捉到活細(xì)胞亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)的快速動(dòng)態(tài)變化。
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圖1 OS-PM跟蹤活細(xì)胞中脂質(zhì)膜的快速動(dòng)態(tài)變化。(a) 用尼羅紅標(biāo)記的不同亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)的成像結(jié)果，速度為30 f.p.s。寬場(chǎng)（左）、寬場(chǎng)偏振調(diào)制（中）和光學(xué)切片偏振調(diào)制（右）。(b) (a) 中的放大圖像和延時(shí)圖像，比例尺：2μm。
雙色光學(xué)切片偏振調(diào)制（OS-PM）技術(shù)能夠快速、準(zhǔn)確地對(duì)極性和非極性脂質(zhì)膜的脂質(zhì)順序進(jìn)行成像，這對(duì)于研究脂質(zhì)流動(dòng)性至關(guān)重要。鑫圖Dhyana 400BSI相機(jī)采用背照式sCMOS芯片技術(shù)，具有高靈敏、高速和高動(dòng)態(tài)成像優(yōu)勢(shì)，不僅可以快速檢測(cè)微弱的熒光信號(hào)，減少光毒性和光漂白，還能快速捕捉活細(xì)胞動(dòng)態(tài)變化過(guò)程，提高測(cè)量精度和成像效率。
參考文獻(xiàn)
Zhanghao K, Liu W, Li M, et al. Fast, Accurate Polarization and Polarity Imaging with Polarized Structured Illumination[J]. bioRxiv, 2019: 640268.
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